家蚕浓核病毒镇江株非结构蛋白2(NS2)的表达及活性研究

• 作者: 刘挺 唐顺明 覃光星 赵盼 郭锡杰
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 浓核病毒 非结构蛋白 表达 活性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 2149-2155
• 页数: 7页
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.06.035

摘要

[目的]对家蚕浓核病毒镇江株非结构蛋白2(NS2)基因进行克隆、表达,并测定表达产物的生物活性.[方法]利用PCR技术从家蚕浓核病毒镇江株(BmDNV-Z)基因组中扩增得到非结构蛋白2(NS2)基因片段,将其克隆到表达载体pET28a得到重组表达质粒pET28a-NS2,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,SDS-PAGE和Western blot检测,表达产物经Ni柱纯化,经过复性检测其Helicase和ATPase活性.[结果]克隆获得了BmDNV-Z NS2基因,并在大肠杆菌中得到了成功表达,表达产物经Ni柱纯化获得了目的蛋白NS2.纯化的NS2蛋白具有Helicase活性,能将双链DNA底物解旋成为单链,并且具有一定的底物极性选择性,对于极性底物表现出更高的解旋活性.同时,纯化的NS2蛋白具有ATPase活性,其酶活力可达到0.276μmol·μg-1·h-1.[结论]BmDNV-Z NS2基因编码的病毒非结构蛋白具有Helicase和ATPase活性,并且Helicase活性具有一定的底物极性选择性,推测该基因在病毒DNA的复制过程中发挥重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭锡杰	江苏科技大学生物与环境工程学院	43	155	7.0	10.0
5	赵盼	江苏科技大学生物与环境工程学院	4	20	2.0	4.0