利用重叠PCR实现乙肝表面抗原CTL表位的替换

• 作者: 李明松 王文敬 黎诚耀
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 表位替换 磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白 细胞毒T淋巴细胞表位 重叠延伸PCR
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 589-591
• 页数: 3页
• 分类号: R392-33|R392.11|R512.62
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.07.008

摘要

目的 以磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白(glypican-3,GPC3)的CTL表位EYILSLEEL替换HBsAg中内源性CTL表位LLD,构建用于预防和治疗乙肝的DNA疫苗.方法 以重组表面抗原基因pcHBsAg质粒为模板,应用重延伸PCR扩增出含EYILSLEEL表位的HBsAg基因HBsAg/GPC3,将其插入pBSSK+载体中,构建出pBSSK/GPC3载体.利用DNA重组技术将其定向插入真核表达载体pcDNA3.1+中,将真核表达载体经PCR、酶切和测序鉴定,构建表达CTL表位EYILSLEEL的DNA疫苗.结果 酶切和测序的结果显示序列无错配,获得了完整表达EYILSLEEL表位的真核质粒pcDNA3-HBsAg/GPC3.结论 成功将EYILSLEEL表位替换HBsAg的内源性CTL表位,构建了pcDNA3-HBsAg/GPC3真核表达质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王文敬	南方医科大学生物技术学院输血医学系	47	192	7.0	11.0
2	黎诚耀	南方医科大学生物技术学院输血医学系	36	184	8.0	11.0
3	李明松	南方医院消化科	1	0	0.0	0.0