酶消化分离法原代培养人鼻黏膜上皮细胞的改进

• 作者: 张革化 李源 杨继红 魏燕
• 来源期刊: 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻黏膜 上皮 细胞培养
• 年，卷（期）: 2009,（23）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1066-1068
• 页数: 3页
• 分类号: R765.25
• 字数: 2577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1781.2009.23.004

摘要

目的:探讨酶消化分离法原代培养人鼻黏膜上皮细胞的实验步骤和技术要点,以提高原代培养成功率,为后续实验提供良好的培养模型.方法:在酶消化分离细胞、无血清培养法的基础上,对取材处理、消化酶应用等步骤进行改进,如翻揭分离获取黏膜层、消化中加入Ⅰ型DNA酶(DNase type Ⅰ)、胶原酶消化后含黏膜块的溶液中直接加入胰蛋白酶,以及应用不包被的培养皿培养等.原代培养的鼻黏膜上皮细胞经免疫荧光染色细胞角蛋白(CK)8/18进行鉴定.结果:鼻黏膜原代培养细胞生长良好,6～8 d汇合可用于后续实验.CK8/18免疫荧光染色阳性鉴定为上皮源性细胞.结论:酶消化分离细胞、无血清培养法可成功建立人鼻黏膜上皮细胞原代培养模型,对取材处理、酶消化等步骤进行上述改进,可提高原代培养成功率,并获得一定数量级,以及纯度较高和可靠的原代上皮细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李源	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	64	401	11.0	17.0
2	张革化	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	93	510	12.0	17.0
3	杨继红	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	3	14	2.0	3.0
4	魏燕	中山大学附属第三医院耳鼻咽喉头颈外科	3	36	3.0	3.0