改良胎鼠视网膜干细胞的分离培养方法

• 作者: 叶剑 尹小磊 袁容娣 郑政
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜 干细胞 细胞培养技术 细胞分化
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 183-185
• 页数: 3页
• 分类号: R77|Q813
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2009.02.017

摘要

目的 对大鼠胚胎视网膜干细胞的培养方法进行改良,并观察其生长及分化特性,以期寻求有效的视网膜干细胞培养方法. 方法 取18d孕龄的SD大鼠视网膜睫状缘(CMZ)色素上皮层组织,通过剪切、吹打、胰酶消化、过滤、离心后,在DMEM/F12培养基中加入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),用无血清培养技术扩增视网膜干细胞;传代后离心收集培养细胞,以5%胎牛血清诱导细胞分化;用免疫细胞化学技术对十细胞及诱导分化的细胞进行鉴定,确定所培养细胞是否为干细胞且具有分化潜能. 结果 从SD胚胎大鼠视网膜中分离的细胞在体外悬浮生长,形成致密的球形细胞团,传代后能够牛成新的细胞团,免疫细胞化学染色显示原代和传代细胞中Nestin和掺入BrDU均呈阳性表达.诱导分化后的细胞经鉴定证明部分表达胸腺细胞表面糖蛋白(Thy1.1). 结论 SD胎鼠视网膜内存在视网膜干细胞,通过改良方法可以进行体外培养和扩增,产生分化,部分分化细胞具有视网膜神经细胞特性,包括分化形成节细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁容娣	第三军医大学大坪医院眼科	61	228	7.0	12.0
2	叶剑	第三军医大学大坪医院眼科	107	534	13.0	17.0
3	郑政	第三军医大学大坪医院眼科	4	42	3.0	4.0
4	尹小磊	第三军医大学大坪医院眼科	16	48	4.0	5.0