Smad4真核表达质粒的构建及转染结肠癌细胞系SW480

• 作者: 付祥胜 张亚历 田笑笑
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: Smad4 结肠肿瘤 真核表达质粒 转染
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 348-350
• 页数: 3页
• 分类号: R73
• 字数: 3428字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2009.03.011

摘要

目的 构建Smad4真核表达质粒并筛选稳定表达野生型Smad4基因的SW480结肠癌细胞系.方法 提取正常人体胎盘组织总RNA,PCR扩增人野生型Smad4基因,通过DNA重组技术将该基因片段重组于peDNA3.1(+)真核表达载体上,构建peDNA3.1(+)-Smad4重组质粒,通过PCR扩增、酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组DNA进行鉴定,脂质体介导方法转染结肠癌细胞系SW480,G418筛选稳定表达株,RT-PCR 方法检测其mRNA表达水平.结果 Smad4基因的PCR电泳结果显示在1700 bp左右有一明显亮带,连接载体后经鉴定证实为人Smad4-cDNA;稳定转染Smad4基因的SW480细胞RT-PCR结果提示Smad4的mRNA表达水平比对照细胞组明显升高.结论 成功扩增野生型Smad4基因,构建Smad4真核表达质粒,并筛选出Smad4基因稳定表达的SW480结肠癌细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张亚历	南方医科大学南方医院消化内科	121	704	15.0	21.0
2	付祥胜	南方医科大学南方医院消化内科	4	28	3.0	4.0
3	田笑笑	南方医科大学南方医院消化内科	2	17	1.0	2.0