TAT-PDX1融合蛋白诱导人胎肝间充质干细胞向胰岛β细胞分化

• 作者: 姜铧 张洹 李东升 梁清乐
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 人胎肝间充质干细胞 TAT-PDX1蛋白 胰岛β细胞 分化
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 48-52
• 页数: 5页
• 分类号: R3942
• 字数: 5141字
• 语种: 中文

摘要

背景:PDX1是决定胰岛β细胞功能的关键因子,应用穿膜蛋白TAT将PDX1蛋白导入细胞内,若能发挥诱导分化作用将使干细胞治疗糖尿病向临床应用更进一步.目的:观察TAT-PDX1融合蛋白诱导人胎肝间充质干细胞向胰岛B细胞分化的能力.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-05/2008-03在郧阳医学院附属太和医院湖北省胚胎干细胞研究重点实验室完成.材料:流产胎儿来源于肝功能正常、HBsAg(-)的健康产妇,TAT-PDX1融合蛋白由美国佛罗里达大学医学院唐东启博上惠赠.方法:采用贴壁法体外分离培养人胎肝间充质干细胞,传至第3代加入20 mol/L TAT-PDX1融合蛋白诱导,分别于第4,6,8,10天向诱导细胞中加入含葡萄糖的DMEM/F12培养基.主要观察指标:诱导后细胞形态变化及双硫腙染色结果,RT-PCR检测胰岛β细胞特异基因的表达,放射免疫法测定胰岛素累积分泌量.结果:人胎肝间充质干细胞易于体外分离和扩增,加入TAT-PDX1融合蛋白诱导后细胞由梭形逐渐变圆,并形成胰岛样细胞团,双硫腙染色呈棕红色.诱导第4,6,8,10天细胞序贯表达胰岛β细胞特异基因,NeuroD基因最先出现,随后消失,Nkx2.2,Pax4,Nkx6.1,ISL-1基因随后依次出现.诱导后胰岛素累积分泌量逐渐增加,葡萄糖刺激后2～4周细胞胰岛素基础分泌量和刺激后胰岛素分泌量均显著增加,且可以维持在较高水平.结论:TAT-PDX1融合蛋白能诱导人胎肝间充质干细胞向胰岛β细胞分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李东升	郧阳医学院附属太和医院湖北省胚胎干细胞研究重点实验室	38	138	6.0	9.0
2	张洹	暨南大学医学院血液病研究所	219	1146	17.0	21.0
3	姜铧	暨南大学医学院血液病研究所	25	63	5.0	6.0
7	梁清乐	郧阳医学院附属太和医院湖北省胚胎干细胞研究重点实验室	3	2	1.0	1.0