RNAi沉默Smad4基因表达对人前列腺癌细胞增殖的影响

• 作者: 吴开杰 张栋 曾津 王新阳 王蓉 薛玉泉 薛艳 贺大林
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺癌 肿瘤进展 RNA干扰 Smad4
• 年，卷（期）: 2009,（13）
• 所属期刊栏目: 专题报道:泌尿男生殖系肿瘤的基础与临床研究
• 页码范围: 1250-1253
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2|R737.25|R730.231
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.13.005

摘要

目的 观察RNA干扰技术沉默Smad4基因表达对人前列腺癌细胞增殖能力的影响,探讨Smad4在前列腺癌恶性进展中的作用.方法 用半定量RT-PCR和Western blot方法检测LNCaP、PC-3、DU145以及ARCaP亚细胞系IF11、IA8等多种不同前列腺癌细胞Smad4 mRNA及蛋白表达的情况,筛选出Smad4基因阳性表达的细胞;针对Smad4基因不同部位设计并化学合成3对不同的靶向小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),脂质体介导瞬时转染阳性表达Smad4的细胞,转染后48 h分别用RT-PCR和Western blot检测Smad4 mRNA及蛋白表达水平的变化,用MTT法检测沉默Smad4表达对细胞增殖的影响.结果 检测的5种前列腺癌细胞中仅LNCaP、PC-3、DU145 3种细胞表达Smad4 mRNA及蛋白;选择PC-3细胞做siRNA转染,与阴性对照序列组(siRNA-NC)相比,转染48 h后,转染SiRNA1、SiRNA2、SiRNA3的3组PC-3细胞的Smad4 mRNA表达水平均显著下降,但仅有siRNA3组Smad4蛋白表达水平显著降低.转染SiRNA3沉默Smad4基因表达后PC-3细胞的体外增殖能力显著增强(P＜0.05).结论 不同前列腺癌细胞Smad4基因的表达存在差异,靶向siRNA下调Smad4的表达可增强前列腺癌细胞的增殖能力.