结核分支杆菌扩增体系的建立、优化及评价

• 作者: 冯怀志 匡红 孙薏 府伟灵 张聪 李玉红 李硕 陈庆海
• 来源期刊: 四川医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核分支杆茵 聚合酶链反应 快速检验
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基金论文
• 页码范围: 613-616
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0501.2009.05.002

摘要

目的 建立并优化结核分支杆茵PER反应扩增体系,并对所建立的体系进行评价.方法 根据GenBank找到结核分支杆茵基因序列,在Primer Premier V5.0软件上设计结核分支杆菌特异性引物.并对反应体系中MgCl2、引物、dNVTP浓度以及引物退火温度优化后建立结核分支杆茵PCR反应扩增体系.通过对TB标准株、TB临床分离株和临床阳性标本扩增产物的直接测序、灵敏性试验以及特异性试验对PCR反应体系进行综合评估.结果 TB PCR反应体系阳性扩增结果 为在琼脂糖凝胶电泳上出现245bp的条带.MgClM2、引物以及dNTP在TB PCR体系中优化后最佳终浓度分别为:4rmnol/L、0.04μmol/L以及0.3mmol/L.TB PCR体系的退火温度优化后为55℃.TB标准株及TB临床分离株和临床阳性标本扩增产物的直接测序结果 与GenBank中公布的序列完全一致.TB PCR反应体系对其它细茵无交叉反应.检测限度为10拷贝/μl的DNA.结论 TB PCR反应体系能够快速对,IB标准株、TB临床分离株及临床标本进行结核分支杆菌的鉴别.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	府伟灵	第三军医大学西南医院检验科	406	5132	33.0	56.0
2	孙薏		23	168	8.0	12.0
3	李硕		50	156	7.0	9.0
4	匡红		37	152	7.0	10.0
5	冯怀志		54	154	7.0	9.0
6	陈庆海	第三军医大学西南医院检验科	59	381	9.0	18.0
7	张聪		74	321	10.0	12.0
8	李玉红	第三军医大学基础部细胞生物学教研室	12	43	4.0	6.0