利用DIGE和RP-HPLC-ESI/MS技术寻找慢性移植肾失功患者血清标志物

• 作者: 何文涛 吴轲 周绍棠 周鸿敏 张维娜 徐逸 方泽民 昌盛 杜敦峰 林星光 蔡兰军 郭晖 陈忠华 雒真龙 高英
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 肾移植 慢性移植物失功 蛋白组学 血清
• 年，卷（期）: 2009,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3363-3366
• 页数: 4页
• 字数: 4078字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2009.20.003

摘要

目的:利用蛋白组学二维差异性凝胶电泳(2-D DIGE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)联合电喷射离子化质谱(ESI/MS)技术寻找慢性移植肾失功患者血清生物标志物.方法:血清样本分成4组,慢性移植物失功组(CGD组)、移植后长期肾功能稳定组(SRF组)、急性排斥组(AR组)和健康对照组(N组).血清样本经多重亲和排除柱去除高丰度蛋白处理后,使用2-D DIGE技术找到差异蛋白点.切下这些差异蛋白点,胰蛋白酶消化,经RP-HPLC-ESI/MS分析鉴定,在另一独立样本中对鉴定出的差异蛋白Galectin-7进行ELISA验证.结果:在CGD组患者血清中差异表达的蛋白共有39个,质谱鉴定出22个,包括栽脂蛋白A-I前体,补体C4-A前体,Galectin-7等.ELISA结果提示CGD组患者血清中Galectin-7的表达较SRF组和N组有明显增高.结论:找到的这些差异蛋白具有不同的生物功能,为大样本、多中心的验证奠定了基础.Galectin-7可能是CGD的血清标志物,并对CGD的发病机制和治疗策略提供新的思路.