新生昆明小鼠胰腺巢蛋白阳性细胞的自然分化

• 作者: 何少健 刘琼东 叶健 胡利霞 莫似恩 袁路 陈维平
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺 巢蛋白 分化
• 年，卷（期）: 2009,（14）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 2680-2684
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5749字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.14.014

摘要

背景:胰腺干细胞在常规培养条件下易于分化,难以获得足够数量的种子细胞.目的:探讨体外培养条件下小鼠胰腺内、外分泌部的巢蛋白阳性细胞的分化情况.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-08/2007-08在广西医科大学基础医学院中心实验室完成.材料:SPF级新牛昆明系小鼠25只,由广西医科大学实验动物中心提供.方法:以Ⅳ型胶原酶消化小鼠胰腺组织,采用Percoll不连续密度梯度法分离单个细胞混悬液,分别从第1界而(磷酸盐缓冲液/1.068 g/L Percoll液)、第2界面(1.068 g/L Percoll液,1.096 g/L Percoll液)、第3界面(1.096 g/L Percoll液/1.118 g/L Percoll液)收集细胞,添加角质细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子的低糖DMEM培养基进行体外连续培养.主要观察指标:双硫腙染色判断各界面细胞的来源,免疫组织化学检测各界面细胞巢蛋白、胰十二指肠同源盒基因蛋白1,角蛋白19的表达.结果:从第1,2界面收集到的细胞80%～90%双硫腙染色后胞质呈铁红色,表明主要来源于胰腺的内分泌部:从第3界面收集到的细胞双硫腙染色后胞质不染色,表明来源于胰腺的外分泌部.从胰腺的内、外分泌部均可分离出大、圆、单个核的细胞,巢蛋白染色呈阳性表达.随着体外培养时间的延长,来源于胰腺内分泌部的巢蛋白阳性细胞形态保持不变,呈集落样生长.表达胰十二指肠同源盒基因蛋白1,有向胰腺内分泌部β-细胞分化的趋势;来源于胰腺外分泌部的巢蛋白阳性细胞争铺路石样形态,表达细胞角蛋白19,出现向导管上皮细胞分化的趋势.结论:新生昆明小鼠胰腺的内分泌部和外分泌部均存在巢蛋白阳性的细胞,前者具有分化为β-细胞的能力,后者具有分化为导管上皮细胞的能力.