摘要:
背景:目前国内外寻找膀胱平滑肌细胞替代细胞的研究均处于摸索阶段,间质干细胞移植是比较理想的选择,人羊膜间质细胞不仪有分化心肌细胞样特性,而且还可以分泌神经生长因子等,促进局部结构修复.目的:探讨人羊膜间质细胞植入大鼠冻伤膀胱后向平滑肌细胞的分化情况,及其对膀胱肌层本身修复的影响.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006 10,2007-04在日本信州大学完成.材料:人羊膜取自健康足月妊娠产妇.清洁级雌性SD大鼠18只,随机分为正常膀胱细胞移植组、冻伤膀胱对照组、冻伤膀胱细胞移植组,6只,组.方法:羊膜剪碎后,与含胰蛋白酶的DMEM培养基混合,去除上皮细胞,加入含胶原蛋白酶、DNA酶的DMEM培养基,分离获取人羊膜间质细胞备用.冻伤膀胱对照组、冻伤膀胱细胞移植组大鼠用-70℃干冰制冷的铁棒冻灼膀胱顶部后侧,3d后膀胱壁冻伤处出现血肿,前者向血肿内.沣射DMEM培养液100μL,后者向血肿内注射等量人羊膜间质细胞悬液(105个细胞).正常膀胱细胞移植组直接将人羊膜间质细胞移植入正常膀胱肌层中.3周后切取含部分尿道的膀胱组织,制备膀胱切片标本.主要观察指标:采用苏木精-伊红染色观察膀胱平滑肌修复情况,荧光免疫组织化学检测膀胱壁中人羊膜间质细胞的分化.结果:与正常膀胱细胞移植组比较,冻伤膀胱细胞移植组膀胱壁肌层结构趋于正常,纤维化少见,平滑肌细胞增殖良好;冻伤膀胱对照组膀胱壁修复缓慢.肌层结构紊乱,出现不同程度的纤维化,呈瘢痕样,且有炎症细胞存在.3周后正常膀胱组织内未找到人羊膜间质细胞,冻伤膀胱细胞移植组膀胱肌层中仍有大量人羊膜间质细胞存活,且少量已分化为膀胱平滑肌细胞.结论:人羊膜间质细胞具有分化为膀胱平滑肌细胞的潜能,同时可以促进损伤膀胱壁肌层自身修复.