保存温度与时间对动物组织DNA提取质量的影响

• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 三疣梭子蟹 肌肉组织 DNA提取 保存条件
• 年，卷（期）: 2009,（33）
• 所属期刊栏目: 动物与饲料科学
• 页码范围: 16407-16409
• 页数: 3页
• 分类号: S813
• 字数: 3297字
• 语种: 中文

摘要

[目的] 研究不同保存温度、不同保存时间对蟹肉总DNA提取质量的影响,为同类研究提供借鉴.[方法] 将样品在4、-20和-40 ℃下分别保存4、8和15 d,提取螯足内肌肉总DNA,测定总DNA的紫外吸收值,并设计引物扩增其mtDNA ND6基因,采用琼脂糖凝胶电泳分别对提取的总DNA及PCR结果进行检测.[结果] 由鲜活蟹组织提取的DNA A_(260)与A_(280)的比值因蛋白污染而较低;15 d内4 ℃与-40 ℃条件下保存的DNA提取率和条带检出率均无明显差异,而-20 ℃下的保存效果受时间影响明显.各处理组合总DNA的 A_(260)与A_(280)比值在1.79～2.00;利用上述DNA作模板,扩增其特定基因mtDNA ND6均可获得预期长度的PCR条带.[结论] 短期保存组织宜选择4 ℃,若需较长时间保存时则宜选择-40 ℃以下的低温.