Ⅰ型马立克氏病强弱毒株Meq基因的克隆与序列分析

• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: MDV Meq基因 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2009,（30）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 14604-14606
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2334字
• 语种: 中文

摘要

[目的]为获得MDV-1强弱毒株Meq基因序列的差异.[方法]根据GENE BANK登录的马立克氏病毒Meq基因序列,设计一对引物,采用PCR技术对MDV-Ⅰ型国内商用CVI988/Rispens疫苗株和参考强毒京-1(BJ-1)株的Meq基因进行了扩增,并将扩增产物提纯后克隆到pcDNA3.1(+)上,进行酶切鉴定及测序验证.[结果]CVI988疫苗株和BJ-1强毒株的Meq基因开放阅读框(ORF)长度分剐为1 200和1 197 bp.通过与国际标准强毒GA株Meq基因进行比较,BJ-1株和CVI988株Meq基因中分别有一段180和177 bp的插入序列,第211位核苷酸由G变为T,导致第71住氨基酸由丙氨酸A变为丝氨酸S;同时,CVI988株Meq基因第228位核苷酸由A变为G,导致第77位氨基酸由赖氨酸K变为谷氨酸E.此外,与BJ-1株相比,CVD88株Meq基因在576～578 bp之间缺失3个碱基(ACC),并导致第193位脯氨酸P的缺失,该突变发生在一个多脯氨酸重复区域内.[结论]MDV-1强弱毒株Meq基因序列存在明显差异,为从其分子水平进行区分及生物学功能的研究奠定了基础.