人血小板膜糖蛋白功能测定的酶联免疫分析方法的建立

• 作者: 何杨 张有涛 朱明清 赵益明 阮长耿
• 来源期刊: 苏州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 血小板 膜糖蛋白 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 方法与技术
• 页码范围: 291-295
• 分类号: R331.1+43
• 语种: 中文

摘要

目的 建立测定血小板膜糖蛋白(GP)功能的酶联免疫分析(ELISA)方法 ,并对其灵敏度、批内和批间差异进行方法 学考核.方法 以抗血小板CD62P单抗SZ51和抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/m a)单抗7E3分别包板.加入经ADP诱导的或未诱导的正常人富含血小板血浆(PRP),以生物素标记的抗GPlb单抗SZ2(Biotin-SZ2)反应后,加入亲和素标记的辣根过氧化物酶(Avdin-HRP)检测,邻苯二胺(OPD)显色后,酶标仪读取吸光度(A)值.对其灵敏度及批内、批间差异作方法 学评估,应用该方法 对抑制性单抗SZ-21和阿司匹林抑制血小板活化的功能效果进行测定,并与流式细胞术(FCM)测定结果 进行比较.结果 该方法 可检测血小板计数低达6.25×109/L(SZ31包被板)和3.13×109/L(7E3包被板)的标本,批内和批间变异系数均小于10%.测得50名健康正常人ADP诱导的(未诱导的)血小板的CD62P和GPⅡ b/Ⅲa的A值分别为0.68±0.21(0.18±0.09)和0.87±0.29(0.44 4±0.14).ELISA测定结果 表明,SZ21和阿司匹林可明显抑制ADP诱导的血小板功能.流式细胞仪测定ADP诱导的(未诱导的)人血小板表面CD62P和GPⅡ b/Ⅲa的阳性细胞百分率分别为(60.1±7.12)%[(2.56 4±0.61)%]和(86.32±17.82)%[(20.25±14.56)%].其批内和批间变异系数均<10%.结论 该方法 可以测定血小板功能活化剂或抑制剂对血小板功能的影响,可以测定血栓性疾病或血栓形成相关性疾病引起的血小板活化程度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮长耿		15	57	4.0	7.0
2	赵益明		4	2	1.0	1.0
3	朱明清		3	7	2.0	2.0
4	何杨		2	6	2.0	2.0
5	张有涛		1	2	1.0	1.0