苦瓜核糖体失活蛋白MAP30的原核表达和生物活性研究

• 作者: 丁倩 张黎黎 詹金彪
• 来源期刊: 浙江大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: MAP30 苦瓜 植物蛋白质类 核糖体蛋白质类 遗传学技术 重组,遗传
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 264-271
• 分类号: R996
• 字数: 4360字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2010.03.009

摘要

目的:从苦瓜籽中克隆HIV-1整合酶抑制剂MAP30,构建其表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,用于MAP30在细胞内的转运机理研究.方法:从成熟苦瓜种子中提取基因组DNA,通过PCR的方法扩增出MAP30基因的全长,并将其克隆进入原核表达载体pET-30a,转化Eoli.BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和纯化,梯度咪唑洗脱.MTT法分析生物学活性.结果:测序发现插入的MAP30基因序列正确,SDS-PAGE鉴定表达产物分子量正确,且MAP30主要以可溶形式表达.MTT法测定重组的MAP30具有生物学活性,且对肿瘤细胞的毒性远远大于对正常细胞的毒性.结论:本研究成功地构建了MAP30的表达系统,并实现了MAP30的可溶性表达,表达后的蛋白具有生物学活性,可用于抗体-毒素的肿瘤靶向药物的合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁倩	浙江大学医学院生物化学与遗传学系	11	47	4.0	6.0
2	詹金彪	浙江大学医学院生物化学与遗传学系	45	200	8.0	12.0
3	张黎黎	浙江大学医学院生物化学与遗传学系	2	23	2.0	2.0