一种基于单核苷酸多态性位点的定量检测异基因造血干细胞移植后嵌合率的新方法

• 作者: 宋献民 王健民 王利平 章卫平 蔡在龙 邵宇 龚胜兰
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 造血干细胞移植 嵌合体 多态性 单核苷酸 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 92-96
• 页数: 5页
• 分类号: R4
• 字数: 4359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2010.02.005

摘要

目的 建立一种单核苷酸多态性-聚合酶链反应(SNP-PCR)定量检测异基因造血干细胞移植后供受嵌合率的新方法 ,探讨其可行性、准确性及优越性.方法 利用18个SNP位点筛选移植前每一对供、受者,采用实时定量PCR(RQ-PCR)对筛选出的差异位点行嵌合率定量分析,通过倍比稀释、模拟嵌合与微卫星重复序列-PCR(STR-PCR)、性染色体双色荧光原位杂交(XY-FISH)和融合基因的定量检测,比较、验证方法 的准确性及敏感度.结果①利用内参质粒标准品扩增的17次标准曲线,平均斜率为-3.39,平均截距为39.97,相关系数均＞0.995,扩增效率接近理想水平;批内差及批间差分别为0.50%和1.10%,在可控范围;与模拟混合嵌合相关系数在0.99以上;可重复敏感度达0.01%.②40例移植患者中,95%以上可以筛选出供、受者差异SNP位点;SNP-PCR与STR-PCR结果吻合率达96.7%,与XY-FISH结果比较差异无统计学意义(P＞0.05);SNP-PCR与特定白血病融合基因检测结果比较,完全嵌合(CC)标本均未检出肿瘤相关的融合基因,部分嵌合(MC)标本融合基因均为阳性.结论 SNP-PCR检测嵌合率准确、敏感、易行,具有极高的临床应用前景,克服了STR-PCR竞争抑制及扩增平台期偏倚的缺点,可以替代其进行临床常规检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章卫平	第二军医大学附属长海医院血液科	106	446	11.0	15.0
2	王健民	第二军医大学附属长海医院血液科	194	921	13.0	22.0
3	宋献民	第二军医大学附属长海医院血液科	47	191	8.0	10.0
4	邵宇	第二军医大学附属长海医院血液科	4	23	3.0	4.0
5	王利平	第二军医大学附属长海医院血液科	3	32	3.0	3.0
6	蔡在龙	第二军医大学附属长海医院血液科	36	167	7.0	10.0
7	龚胜兰	第二军医大学附属长海医院血液科	2	36	2.0	2.0