不同核酸提取方法在HBV DNA荧光定量检测中的比较

• 作者: 李成德 陈雄毅 黄晓佳
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 核酸扩增技术 肝炎病毒,乙型 聚合酶链反应一步法 煮沸法 磁珠法
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1361-1363
• 分类号: R446.61|R512.62
• 字数: 2461字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2010.12.009

摘要

目的 研究不同核酸提取方法在HBV DNA荧光定量检测中的提取效率、重复性、抗干扰性及对扩增试剂的兼容能力.方法 运用两种具有不同启动温度的Taq酶的扩增试剂分别扩增经一步法、煮沸法和磁珠法提取HBV DNA强阳性血清的模板,比较不同提取方法对扩增试剂的兼容能力.采用3种方法提取3份HBV DNA含量不同的标本各10次,进行扩增,比较不同方法的提取效率和重复性;对HBV DNA阳性标本用HBV DNA阴性的黄疸血清和溶血液进行10倍稀释后分别用前述方法提取进行干扰试验.结果 3种提取方法中,磁珠法和煮沸法提取的模板对两种扩增试剂具有良好的兼容性;重复性比较以一步法最佳,磁珠法次之,煮沸法较差;提取效率比较以磁珠法最理想,一步法次之,煮沸法最差;对黄疸和溶血的抗干扰能力以磁珠法最佳,溶血对煮沸法有一定影响,在无5-羧基-X-罗丹明(5-ROX)校正的情况下,黄疸对一步法影响较大,有5-ROX校正系统分析则可以消除这种影响.结论 磁珠法具有良好的重复性和提取效率,对黄疸和溶血有较强抗干扰能力,对扩增试剂的兼容性好,是一种理想的核酸提取方法;相对而言,一步法快捷且重复性更佳.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈雄毅	广东省肇庆市第一人民医院检验科	6	31	2.0	5.0
2	李成德	广东省肇庆市第一人民医院检验科	14	83	5.0	9.0
3	黄晓佳	广东省肇庆市第一人民医院检验科	5	37	2.0	5.0