摘要:
目的 考察慢性肾功能衰竭(CRF)模型大鼠肾脏组织NF-kB-p65 与血清C反应蛋白(CRP)和白细胞介素6(IL-6)浓度的关系,并探讨虫草菌丝对NF-kB表达的抑制作用及其用于治疗微炎症反应的可能性.方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)阳性对照组、虫草菌丝3和6 g·kg-1治疗组.建模前1 d各组大鼠尾静脉抽血,并留取24 h尿液,第2天假手术组行假手术,其余4组切除右肾上、下两极约70%肾脏;10 d后假手术组再次进行"假手术",其余4组再经左腹壁切除左肾,制备5/6肾切除CRF大鼠模型.建模2周后,PDTC组隔日ip给予PDTC 0.01 g·kg-1,虫草菌丝治疗组分别ig给予虫草菌丝3和6 g·kg-1,每天1次,共12周;假手术组和模型组ig给予等体积生理盐水;给药12周后各组留取血样和24 h尿液,处死大鼠取肾.ELISA法检测血清CRP和IL-6浓度,全自动生化仪检测血清肌酐浓度,考马斯亮蓝法测定24 h尿蛋白,实时荧光定量RT-PCR法和免疫组织化学法检测肾组织NF-kB-p65 mrRNA和蛋白表达.结果 ①建模前,各组大鼠24 h尿蛋白和血清肌酐浓度无明显差异;建模14周后,模型组、PDTC组、虫草菌丝3和6 g·kg-1 组24 h尿蛋白和血清肌酐浓度较建模前均明显升高(P<0.01),模型组较假手术组亦明显升高(P<0.01);模型组大鼠肾组织均出现肾小球球囊粘连、局灶节段性硬化及肾小管灶状萎缩和代偿性肥大等CRF病理改变;给药12周后,PDTC组、虫草菌丝3和6 g·kg-1组大鼠肾组织病理变化与模型组比较无明显改善,虫草菌丝3和6 g·kg-1组24 h尿蛋白和血清肌酐浓度明显降低(P<0.01).②给药12周后,模型组与假手术组比较,血清CRP和IL-6浓度及肾组织NF-kB-p65mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01),PDTC组、虫草菌丝3和6 g·kg-1组与模型组比较均明显降低(P<0.01),虫草菌丝6 g·kg-1组比3 g·kg-1组降低更为明显(P<0.05).③各组肾组织NF-kB-p66 mRNA表达与血清CRP和IL-6浓度进行直线相关分析结果表明,假手术组肾脏NF-kB-p65 mrRNA表达与血清CRP和IL-6浓度之间无相关性,其余4组肾组织NF-kB-p65 mRNA表达与血清CRP和IL-6浓度明显正相关(P<0.05,P<0.01).结论 CRF大鼠肾脏NF-kB-p65表达与血清CRP和IL-6浓度正相关;虫草菌丝可抑制CRF大鼠肾脏NF-kB-p65 mRr NA和蛋白表达,对CRF大鼠微炎症反应具有一定的治疗作用.