猪圆环病毒Ⅱ型血清抗体ELISA检测方法的建立

• 作者: 吴振糜 周伦江 庄向生 王隆柏 石运通 车勇良 陈如敬 陈少莺 魏宏
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 猪圆环病毒Ⅱ型 ELISA方法 抗体
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 279-285
• 分类号: S858.282
• 语种: 中文

摘要

为了检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)抗体,本试验建立了快速、敏感的ELISA诊断方法.通过比较差速离心、蔗糖不连续梯度离心、氯化铯等密度梯度离心和氯仿抽提结合超速离心等4种方法纯化PCV2抗原的包被效果,来确定最佳的PCV2包被抗原纯化方法,在此基础上,通过全病毒抗原最适包被浓度和二抗HRP-SPA稀释倍数的确定、待测血清稀释倍数的确定、封闭液浓度的确定、封闭时间的确定、HRP-SPA反应时间的确定、临界值的确定、特异性测定、重复性测定、符合率比较等,进一步优化检测PCV2抗体的间接ELISA方法.结果表明:对猪的多种病毒阳性血清进行ELISA检测,只有PCV2阳性血清呈阳性;对6份血清进行4次重复试验,方差分析显示P>0.05,差异不显著;与PCV2-ELISA试剂盒(INGEZIM公司生产)的符合率比较,其总符合率达88.89%.可见,优化建立的检测PCV2抗体的间接ELISA方法特异性强、重复性高、稳定性好,可用于PCV2血清学诊断和血清学普查.