菜豆荚斑驳病毒RT-PCR扩增产物胶体金层析检测方法的建立

• 作者: 吴兴泉 张永江 曹成 李桂芬 魏梅生
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 胶体金 试纸条 菜豆荚斑驳病毒 RT-PCR 核酸检测
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 1024-1027
• 分类号: S565.1
• 字数: 3100字
• 语种: 中文

摘要

菜豆荚斑驳病毒是我国进境植物检疫性有害生物,为了能在现场快速检测出该病毒,将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金层析方法快速简便、直观的优点结合起来,建立了PCR扩增产物的胶体金层析检测方法.该方法是用生物素标记上一个引物,用荧光素(或地高辛)标记上另一个引物,通过PCR扩增产生双标记的扩增产物.将兔抗生物素多克隆抗体与20～30 nm大小的胶体金颗粒结合上并固定在释放垫上,同时在硝酸纤维素层析膜上点上抗荧光素(或地高辛)的单克隆抗体作为T检测点,点上羊抗兔多克隆抗体作为C质控点.这种RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到,同时C点也要显色.用所建立方法在15 min内可检测出菜豆荚斑驳病毒的RT-PCR扩增产物,免去了溴化乙锭染色和电泳的过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴兴泉	河南工业大学生物工程学院	72	427	11.0	16.0
2	魏梅生	中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所	38	178	7.0	12.0
3	张永江	中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所	74	381	10.0	15.0
4	李桂芬	中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所	64	310	10.0	14.0
5	曹成	河南工业大学生物工程学院	4	3	1.0	1.0