RNA干扰沉默HIF-1α基因对宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭的影响

• 作者: 吴维光 曹秀琴 陈亚琼
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 宫颈癌 RNA干扰 低氧诱导因子1α 定植 侵袭
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 284-288
• 页数: 5页
• 分类号: R737.33
• 字数: 2828字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨HIF-1α基因短发夹干扰RNA(shRNA)低氧条件下对宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭能力的作用.方法 针对HIF-1α基因没计并合成2条寡聚DNA片段,退火后将其克隆入pSilencer2.1-U6-neo质粒中,构建shRNA真核表达质粒,脂质体转染人宫颈癌细胞株HeLa细胞.低氧培养后,应用Western blot和定量PCR法检测HIF-1α蛋白及mRNA表达水平;用软琼脂克隆形成实验和体外侵袭实验检测HeLa细胞的定植和侵袭能力.结果 成功构建的HIF-1α shRNA真核表达载体转染宫颈癌HeLa细胞,低氧条件下HeLa细胞的HIF-1α蛋白及mRNA表达下降;同时细胞在软琼脂中克隆形成数和穿透Matrigel膜的细胞数减少.结论 HIF-1α的shRNA真核表达载体在低氧条件下可抑制宫颈癌细胞的定植和侵袭能力.