抗日本血吸虫单链抗体免疫毒素的构建表达及生物学活性鉴定

• 作者: 仇镇宁 任勇亚 冯振卿 朱晓娟 朱进 李玉华 李红 王忠灿 管晓虹 许静 顾春艳
• 来源期刊: 中国血吸虫病防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 scFv PE38KDEL 重组免疫毒素
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 117-121
• 分类号: R383.24
• 字数: 3251字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-6661.2010.02.004

摘要

目的 构建抗日本血吸虫单克隆抗体NP11-4单链抗体和绿脓杆菌外毒素衍生物PE38KDEL的原核融合表达载体,并对其表达产物进行生物学活性鉴定.方法 应用PCR方法体外扩增NP11-4 V_H、V_L、scFv和PE38KDEL基因,经测序后将scFv及PE38KDEL基因通过限制性内切酶双酶切及连接反应,构建原核表达载体pBAD/gIII A-scFvPE38KDEL,转化E.coli Top10F',L-阿拉伯糖诱导表达,表达产物经Western blot及ELISA鉴定其活性.结果 构建了重组免疫毒素表达载体pBAD/gIII A-scFv-PE38KDEL,诱导表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约为70 kD;经变性、复性后的重组免疫毒素与血吸虫可溶性虫卵抗原有较好的结合活性.结论 构建及表达了抗日本血吸虫单链抗体免疫毒素,为血吸虫病治疗提供了一条新思路.