抗CPAα毒素单链抗体基因的克隆和表达及其生物学特性研究

• 作者: 朱平 段相林 许崇波 赵宝华
• 来源期刊: 河北省科学院学报
• 关键词: A型产气荚膜梭菌α毒素 单链抗体 基因克隆 基因表达 中和效应
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 页码范围: 82-87
• 页数: 6页
• 分类号: Q785
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9383.2002.02.005

摘要

应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌(CPA)α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出单链抗体(ScFv)基因,并将其定向克隆于表达载体pHOG21中,构建重组表达载体pHOG-2E3,转化至大肠杆菌XL1-Blue中,筛选出表达菌株XL1-Blue(pHOG-2E3).SDS-PAGE分析结果表明,在20℃用IPTG诱导培养时,表达的ScFv蛋白占菌体总蛋白的25%,ScFv蛋白主要以包涵体的形式存在,但在胞周质和培养上清中也能检测到ScFv蛋白,其中在胞周质中表达的ScFv蛋白占菌体可溶性蛋白的4%.生物学试验结果表明,ScFv基因表达产物不仅能够中和α毒素的磷酯酶C活性,而且对攻击致死剂量α毒素的小鼠产生良好的被动保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵宝华	河北师范大学生命科学学院	238	1801	20.0	28.0
2	段相林	河北师范大学生命科学学院	121	1113	18.0	26.0
3	朱平	解放军军需大学军事兽医研究所	43	288	7.0	15.0
4	许崇波	解放军军需大学军事兽医研究所	15	67	6.0	7.0