抗肿瘤侵袭与转移单链抗体scFV-M97基因克隆及分泌性表达

• 作者: 周春水 徐琳娜 江敏 甄永苏
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 单链Fv抗体片段 重组噬菌体表面呈现技术 Ⅳ型胶原酶 肿瘤侵袭肿瘤转移
• 年，卷（期）: 1998,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 81-88
• 页数: 8页
• 分类号: R730.3
• 语种: 中文

摘要

目的研制抗肿瘤侵袭和转移的单链抗体.方法应用重组噬菌体抗体技术,从小鼠抗Ⅳ型胶原酶杂交瘤C2H5细胞中提取mRNA,构建单链抗体基因并克隆到噬粒pCANTAB5E中,转化大肠杆菌TG1,经M13KO7援救后,得到滴度为5×109pfu/ml单链抗体库.对抗体库进行一轮抗原固相化亲和富集与ELISA筛选鉴定,得到30株阳性噬菌体.结果 DNA序列分析表明,抗Ⅳ型胶原酶单链抗体scFv-M97基因全长732 bp.其中VH 351 bp,编码117个氨基酸;VL 336 bp,编码112个氨基酸,两者以连接肽(Gly4Ser)3相连.阳性噬菌体转染HB2151细胞,经1 mmol/L IPTG诱导培养20 h,培养液上清中有2 μg/ml可溶性单链抗体.免疫印迹证实所表达产物保留了原亲本抗体的特异性和亲合力.结论单链抗体scFv-M97可分泌性表达,为以Ⅳ型胶原酶为靶点的抗肿瘤侵袭与转移的治疗及新型导向药物的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	甄永苏	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	47	510	13.0	20.0
2	徐琳娜	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	2	19	2.0	2.0
3	江敏	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	4	30	3.0	4.0
4	周春水	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所	1	10	1.0	1.0