抗黄曲霉毒素B1单链抗体基因克隆及其结构分析

• 作者: 刘爱平 王佳 王小红 马兰
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 黄曲霉毒素B1(AFB1) 单链抗体(scFv) 重链可变区(VH) 轻链可变区(VL) 沟槽结构
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·蚕桑
• 页码范围: 2064-2070
• 页数: 7页
• 分类号: S859.87
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2017.11.23

摘要

[目的]克隆构建黄曲霉毒素B1(AFB1)单链抗体(scFv)基因,并对其编码蛋白序列和结构进行分析预测,为scFv分子修饰改造及在免疫学检测中的应用提供参考依据.[方法]以抗AFB1单克隆抗体杂交瘤细胞株为原料,通过PCR扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),以(Gly4Ser)3为柔性接头(Linker)拼接构建抗AFB1 scFv基因,并采用在线生物信息学分析软件对其氨基酸序列、理化性质及蛋白结构进行分析预测.[结果]抗AFB1 scFv基因全长744 bp,编码248个氨基酸,分子量为26312.05 Da,理论等电点(pI)5.70,其二级结构中含有35个α-螺旋(占14.11%)、28个β-折叠(占11.29%)、85个延伸链(占34.28%)和100个随机卷曲(占40.32%),在三级结构中连接肽卷曲将VH和VL区域牵拉而相互靠近,形成典型的抗体结构——沟槽结构,是scFv的抗原结合区域.[结论]构建的抗AFB1 scFv其VH含有117个氨基酸、VL含有116个氨基酸,具备典型抗体结构——沟槽结构,能与抗原特异性结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王小红	华中农业大学食品科技学院	55	626	14.0	24.0
2	马兰	华中农业大学食品科技学院	5	55	4.0	5.0
3	刘爱平	四川农业大学食品学院	32	62	4.0	6.0
4	王佳	华中农业大学食品科技学院	12	32	3.0	5.0