抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体单链抗体ScFv的构建和表达

• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 溶藻弧菌 单链抗体 基因工程疫苗
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 735-738
• 页数: 4页
• 分类号: Q812.3
• 字数: 3177字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体ScFv.方法:从分泌抗溶藻弧菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2F4)中提取总RNA,利用RT-PCR技术,克隆该抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),通过基因重组构建VH-VL的表达载体pTAT-AL1,转化大肠杆菌BL21后用IPTG诱导表达.结果:VH基因序列全长369碱基对,编码123个氨基酸,VL基因序列全长339碱基对,编码113个氨基酸,二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,含有4个框架区(FRs)、3个抗原互补决定区(CDRs)及抗体特征性的两个半胱氨酸残基.ELISA测定显示基因工程抗体ScFv与原代抗体一样,具有较高的抗原亲和力.结论:成功构建了抗溶藻弧菌独特型抗体ScFv基因并表达于细菌壁膜间隙和包涵体中,为溶藻弧菌独特型抗体单链抗体ScFv成为新一代基因工程疫苗奠定了初步基础.