抗猪PD-1单克隆抗体的制备与其生物学特性鉴定

• 作者: 周娟娟 孙国鹏 岳锋 张艳芳 朱艳平 李鹏 杨健 王选年
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: PD-1 胞外区 单克隆抗体 效价
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 31-33
• 页数: 3页
• 分类号: S851
• 语种: 中文

摘要

制备猪程序性死亡因子-1(PD-1)单克隆抗体,鉴定其生物学特性.以表达纯化的猪程序性死亡因子-1(Programmed death-1,PD-1)胞外区重组蛋白为抗原,免疫BALB/e小鼠,用细胞杂交瘤技术将免疫BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS0细胞融合,经多次克隆化培养,筛选分泌特异性抗猪PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株.结果:获得1株可稳定分泌抗猪PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2B5,Ig亚型为IgG1,细胞上清和腹水效价分别为1∶1 ×212和1∶2.048×105,酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和Western-Blot结果表明,该株单抗能特异性识别重组猪PD-1胞外区蛋白,流式细胞术结果表明,该单抗可以结合猪外周血单核细胞上PD-1蛋白.结论:成功制备了1株分泌抗猪PD-1单抗的杂交瘤细胞株2B5,为研究猪PD-1/PD-L1通路在猪传染性疾病中的致病机制提供了有力的检测工具.