H9亚型禽流感病毒基质蛋白M1单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 张旭 张树梅 徐大伟 戴晓光 李泽君 滕巧泱 王朝霞 申之义 黄海碧
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: H9亚型禽流感病毒 基质蛋白M1 单克隆抗体 间接免疫荧光 蛋白免疫印迹法
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 8-12
• 分类号: S852.659.5|Q78
• 字数: 3700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2010.03.002

摘要

本研究用纯化的H9N2亚型禽流感病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合.对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得3株能稳定传代并分泌抗H9亚型禽流感病毒基质蛋白M1单克隆抗体的杂交瘤细胞:3G8、2F6、5F2.间接ELISA方法检测,3株单克隆抗体的腹水间接ELISA效价达106以上.构建了真核表达载体pCAGGS-M1并转染于MDCK细胞,以用于腹水的Western blot和间接免疫荧光鉴定.间接免疫荧光结果表明,3株单克隆抗体皆与真核表达蛋白M1反应.这些单克隆抗体的制备为后期研究M1蛋白在流感病毒复制与出芽过程中的重要生物学功能奠定了基础.