实验室快速检测细胞株支原体污染的方法研究

• 作者: 张玮 王明丽
• 来源期刊: 国际生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 支原体属 聚合酶链反应 DNA荧光染色法 污染
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 225-229
• 分类号: R4
• 字数: 3900字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2010.05.001

摘要

目的 建立快速可靠的实验室检测细胞株培养中支原体污染的方法.方法 采用DNA荧光染色试剂对本实验室11株细胞进行荧光染色观察与分析;同时从常见污染细胞的支原体16SrRNA中选择两段高度保守的核酸序列,作为支原体引物,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法对同一批细胞株进行检测,并对两种检测结果进行比较.结果 采用DNA荧光染色法检出11株细胞中有2株细胞出现阳性,阳性率为18.2%;采用PCR方法检测11株细胞,有4株细胞出现阳性,阳性率为36.4%.通过两种方法比较可以发现:DNA荧光染色法检测结果阳性的细胞株用PCR方法检测结果也是阳性.结论 上述两种方法均能有效地检出细胞株中的支原体污染,DNA荧光染色法虽较PCR法灵敏度低,但操作简便易观察;而PCR法成本较高,将两种方法结合应用,对DNA荧光染色法可疑阳性的标本再进行PCR检测,既提高阳性检出率,又节约了成本.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王明丽	安徽医科大学微生物学教研室	174	907	13.0	19.0
2	张玮	安徽医科大学微生物学教研室	4	12	2.0	3.0