前列腺特异的转录因子NKX3.1上调Dicer1基因的表达

• 作者: 倪娜娜 关恒云 姜安丽 张菊 张鹏举 朱闻捷 王坤 胡小燕 陈兆波 陈蔚文
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 同源盒基因NKX3.1 PC3细胞 基因,Dicer1
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 1764-1768
• 分类号: Q7
• 字数: 4170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2010.09.021

摘要

目的: 研究前列腺特异转录因子NKX3.1对Dicer1基因表达的影响.方法: 转染pcDNA3.1-NKX3.1至前列腺癌PC3细胞,通过G418筛选,有限稀释法克隆培养获得NKX3.1稳定转染的PC3细胞-PC3(+);采用基因芯片检测NKX3.1对前列腺癌PC3细胞基因组表达谱的影响.进一步应用RT-PCR、Western blotting进行验证.为进一步检测Dicer1表达增高、促进microRNA的成熟作用,构建了microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞,通过报道基因检测成熟microRNA let-7a-1对其靶序列的作用.结果: 基因组芯片显示,NKX3.1稳定表达的PC3(+)细胞中,Dicer1表达明显高于PC3细胞.RT-PCR、Western blotting结果验证PC3(+)细胞中Dicer1 mRNA和蛋白质的表达水平均高于PC3细胞.microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞后,报告基因检测,PC3(+)细胞中荧光素酶活性明显低于PC3细胞.结论: NKX3.1可上调前列腺癌PC3细胞中Dicer1的表达,促进microRNA的成熟及作用.