H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立

• 作者: 周宏专 孙丹丹 孙继国 曾作财 杨兵 苏霞 赵景义 陈小玲 马志军
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: H1N1猪流感病毒 环介导等温扩增 条件优化
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 24-27
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4044字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2010.05.015

摘要

目的:建立H1N1猪流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法.方法:从GenBank中获得H1N1猪流感病毒血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用Primer Explorer V4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物和内引物,同时以H1N1猪流感病毒的cDNA作为阳性模板,对试验中的几个反应条件进行优化.结果:LAMP检测方法对H1N1猪流感病毒的灵敏度达到4～6个拷贝,其引物对于H9亚型禽流感病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒均无非特异性扩增,表现出良好的特异性.结论:建立的H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,为快速检测猪流感病毒提供了新方法和新思路.