不同培养条件对旋毛虫肌幼虫产生排泄分泌抗原的影响

• 作者: 崔世娟 杨雅平 杨静 王少华 诸欣平 顾园 魏骏飞
• 来源期刊: 首都医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 旋毛虫 排泄分泌抗原 制备方法 Western blotting
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 591-595
• 分类号: R383.15
• 字数: 3397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7795.2010.05.015

摘要

目的 对比在常规1640培养基中和在模拟宿主生理环境的培养液的刺激下旋毛虫肌幼虫排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原产量及成分的变化,同时观察在感染初期ES抗原的不同组分在小鼠体内诱导产生主要抗体的时间,以寻找获得更高产量的肌幼虫ES抗原的制备方法 .方法 在虫数、培养液体积、培养时间、温度、ES抗原体积浓缩倍数等条件相同的情况下,按培养液中小鼠血清超滤液(简称血超)、还原型谷胱甘肽(简称谷胱甘肽)和胆汁粉的不同组合分组, 分别培养肌幼虫并收集ES抗原,再以相同上样体积作SDS-PAGE电泳,Odyssey双色红外激光成像系统扫描凝胶并测定条带信号强度进行定量比较.用Western blotting对比观察不同组ES抗原的活性及成分变化.以旋毛虫人工感染小鼠不同时期收集的血清(感染后15、18、20、21、22、24、27、30、40、50 d)作为一抗进行Western blotting,观察ES抗原主要成分在小鼠体内产生抗体的先后顺序.结果 SDS-PAGE电泳凝胶定量分析结果 显示,血超+谷胱甘肽组、胆汁组和胆汁+血超组的抗原产量明显高于1640培养基组,其中胆汁+血超组的抗原产量最高.Western blotting结果 显示,各组抗原均能被感染血清(感染后40 d)识别产生多个条带,其中血超+谷胱甘肽组的条带中相对分子质量约为87 000的条带荧光信号明显强于其他组;感染初期ES抗原不同组分在小鼠体内产生抗体的先后顺序为:45 000、53 000、41 000,其抗体可被检测到的最早时间分别为感染后15、21、24 d.结论 培养液中添加胆汁粉可大大提高旋毛虫肌幼虫ES抗原产量,胆汁粉与血超共用后ES抗原的增产效果更佳;感染初期肌幼虫ES抗原的不同组分诱导小鼠产生抗体的时间不同.此研究将为改进ES抗原制备方法 ,寻找旋毛虫病早期诊断抗原提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨静	首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室	116	764	15.0	22.0
2	诸欣平	首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室	69	408	11.0	16.0
3	杨雅平	首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室	27	221	9.0	13.0
4	魏骏飞	首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室	9	44	3.0	6.0
5	王少华	首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室	17	186	8.0	13.0
6	顾园	首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室	15	105	5.0	10.0
7	崔世娟	首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室	4	1	1.0	1.0