虾过敏症特异性IgE的ELISA检测方法的研究

• 作者: 刘平静 刘群英 吴静 尤春霞 张晓峰 邬敏辰 陈伟
• 来源期刊: 中国海洋药物
• 学科: 医学
• 关键词: 刀额新对虾 过敏症 变应原 特异性IgE 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 22-27
• 页数: 6页
• 分类号: R446.61|R981
• 语种: 中文

摘要

目的 研制虾过敏症特异性IgE的ELISA检测试剂.方法 以纯化的刀额新对虾的2种主要变应原30 kD和33 kD蛋白为抗原分别包被酶标反应板,对抗原的包被浓度和时间、封闭液的选择与封闭时间、酶标二抗稀释度等ELISA条件进行优化.结果 30 kD和33 kD变应原的最适包被浓度分别为200 ng/孔和12.5ng/孔,最适包被条件为37℃孵育3 h,4℃过夜;酶标反应板的封闭以1.0%BSA、4℃封闭过夜为最适条件;HRP标记的羊抗人IgE抗体以1:1 500为最适稀释度.结论 以刀额新对虾的33 kD主要变应原为诊断抗原研制特异性IgE的ELISA检测试剂,适用于临床虾过敏症的实验诊断.