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摘要:
目的 体外培养、诱导主动脉瓣膜间质细胞钙化,并观察其表型变化.方法 使用胶原酶消化法从新鲜猪主动脉瓣膜上分离并体外原代培养主动脉瓣膜间质细胞,行免疫荧光染色细胞鉴定.取4~8代间质细胞,随机分为两组,实验组:以含甘油磷酸、维生素C、地塞米松的钙化培养基进行钙化诱导培养2周;对照组:以标准培养基培养2周.在光学显微镜下行钙化结节计数,茜素红染色观察并半定量检测钙沉积含量;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测间质细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及钙化相关因子(骨钙素、骨桥蛋白、核心结合因子)的基因表达.结果 从猪主动脉瓣膜上成功分离并体外培养瓣膜间质细胞,α-SMA及波形蛋白(vimentin)染色阳性,血管性血友病因子(vWF)染色阴性.间质细胞钙化诱导培育2周可成功诱导钙化,自发形成钙化结节,实验组钙化结节(156.25±17.38个/孔vs. 2.50±1.29个/孔)和钙沉积 (17.52±2.04 vs. 1.00±0.22) 显著高于对照组(P<0.05); 实时RT-PCR提示:实验组α-SMA、骨钙素、骨桥蛋白、核心结合因子等表达均较对照组明显升高(P<0.05).结论 体外诱导钙化的瓣膜间质细胞呈现相对激活状态,表型向收缩表型和成骨表型转化,可能为瓣膜钙化的病理基础.
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文献信息
篇名 主动脉瓣膜间质细胞体外诱导钙化的实验研究
来源期刊 中国胸心血管外科临床杂志 学科 生物学
关键词 主动脉瓣 钙化 间质细胞 表型
年,卷(期) 2010,(5) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 385-389
页数 分类号 Q813.1+1
字数 3411字 语种 中文
DOI
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 董念国 华中科技大学同济医学院协和医院心血管外科 221 659 11.0 13.0
2 史嘉玮 华中科技大学同济医学院协和医院心血管外科 92 313 10.0 12.0
3 陈思 华中科技大学同济医学院协和医院心血管外科 53 199 6.0 13.0
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主动脉瓣
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间质细胞
表型
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期刊影响力
中国胸心血管外科临床杂志
月刊
1007-4848
51-1492/R
大16开
成都市国学巷37号
62-126
1994
chi
出版文献量(篇)
4865
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5
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