超声破裂载基因微泡增强心肌细胞受磷蛋白反义RNA转染

• 作者: 吕树铮 周渊 宋现涛 张英川 柳景华 汪国忠 苑飞 葛长江 郭成军
• 来源期刊: 中华超声影像学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 超声检查 微气泡 RNA,反义 转染 受磷蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 897-900
• 分类号: R5
• 字数: 3631字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1004-4477.2010.10.026

摘要

目的 探讨超声破裂载基因微泡增强心肌细胞反义RNA转染与表达的效应.方法 构建受磷蛋白(phospholamban,PLB)反义RNA真核表达质粒PcDNA 4.1-asPLB,采用磷酸钙共沉淀、超声辐照及超声破裂载基因微泡等方法介导反义RNA转染.采用RT-PCR及Western blot检测心肌细胞PLB、肌浆网钙ATP酶(sarcoplasmic retculum Ca2+ATPase,SERCA2a)mRNA和蛋白表达水平,观察不同方法介导PLB反义RNA转染对心肌细胞PLB及SERCA2a表达的影响.结果 与空载体PcDNA4.1比较,PcDNA4.1-asPLB能特异地抑制心肌细胞PLB表达(P＜0.05).超声破裂载基因微泡明显增强反义RNA转染与表达,与其他转染组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).PcDNA4.1-asPLB对SERCA2a表达无明显影响,但降低PLB/SERCA2a比值.结论 超声破裂载基因微泡是一种高效的反义RNA转染方法,其介导PcDNA4.1-asPLB转染能明显抑制心肌细胞PLB表达.