水稻白叶枯病抗性基因Xα21和稻瘟病抗性基因Pi-d2激酶蛋白质在毕赤酵母中的表达及条件优化

• 作者: Jinhong Zhang 刘国振 李晓兵 李晓明 李莉云 王书利 王静
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻 白叶枯病 稻瘟病 抗病基因 毕赤酵母 蛋白质表达
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 641-646
• 分类号: Q814
• 语种: 中文

摘要

[目的]白叶枯病和稻瘟病是最主要的水稻病害,Xα21是水稻白叶枯病抗性基因,Pi-d2是稻瘟病抗性基因,二者都编码类受体激酶蛋白质.本研究旨在毕赤酵母系统中表达XA21和PI-D2激酶蛋白质.[方法]用Xα21和Pi-d2的激酶区PCR产物,构建了pPICZαA-Xα21K、pPICZαA-Pi-d2K重组质粒,酶切及测序验证后,将重组质粒线性化,转化到毕赤酵母菌株中,系统地比较了不同酵母菌株(KM71、GS115、X33),不同甲醇浓度(1%、2%、3%),不同pH(pH5、pH6、pH7、pH8)值,不同诱导时间(24 h、48 h、72 h)条件下激酶蛋白质的表达情况.[结果]XA21和PI-D2激酶蛋白质可以在毕赤酵母中表达,但表达的蛋白质不能分泌到培养基上清中,而只能在菌体中检测到,对表达条件的系统比较发现,毕赤酵母菌株KM71和X33、2%的甲醇诱导浓度、pH5和48 h以上的诱导时间有利于激酶蛋白质的表达,最后我们在酵母裂解物上清中获得了纯化的考染可见的激酶蛋白质.[结论]在毕赤酵母中表达了XA21和PI-D2激酶蛋白质,为下一步生化特性研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘国振	河北农业大学生命科学学院	38	488	11.0	21.0
2	王静	中国科学院遗传与发育生物学研究所	151	2547	23.0	47.0
3	李莉云	河北农业大学生命科学学院	28	228	8.0	14.0
4	李晓兵	中国科学院遗传与发育生物学研究所	17	364	9.0	17.0
5	王书利	河北农业大学生命科学学院	2	7	1.0	2.0
6	李晓明	河北农业大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0