小反刍兽疫病毒基因组全长cDNA的构建及其序列的测定

• 作者: 张海瑞 才学鹏 毛立 窦永喜 翟军军 蒙学莲 骆学农
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 RT-PCR 全长cDNA克隆 分子克隆
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 315-321
• 页数: 7页
• 分类号: S852.65+9.5
• 语种: 中文

摘要

根据小反刍兽疫Nigeria 75/1株全基因组序列设计并合成PPRV特异引物,进而应用RT-PCR技术分5段扩增了PPRV全基因组cDNA.将扩增的各个cDNA重叠片段JF1、JF2、JF3、JF4和JF5分别克隆到载体上,建立了PPRV的初级cDNA克隆.在扩增5ˊ末端时,引入AscI酶切位点和T7启动子序列;在基因组3ˊ末段引入PacI酶切位点,后者供cDNA模板的线性化之用.将扩增片段再依次连接,最后亚克隆到质粒pok12中,获得了PPRV全长基因组cDNA克隆pok12-PPRV.通过序列同源性和进化树分析,结果表明,Nigeria 75/1与MV和RPV的遗传关系最近.Nigeria 75/1株全长cDNA的序列测定及构建,为拯救PPRV和在分子水平进一步深入研究PPRV打下坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	骆学农	中国农业科学院兰州兽医研究所	38	174	9.0	12.0
2	才学鹏	中国农业科学院兰州兽医研究所	141	790	15.0	21.0
3	窦永喜	中国农业科学院兰州兽医研究所	42	285	11.0	15.0
4	张海瑞	中国农业科学院兰州兽医研究所	3	5	1.0	2.0
5	翟军军	中国农业科学院兰州兽医研究所	4	5	1.0	2.0
6	蒙学莲	中国农业科学院兰州兽医研究所	16	107	5.0	10.0
7	毛立	中国农业科学院兰州兽医研究所	4	0	0.0	0.0