昆明小鼠胚胎干细胞向心肌细胞的分化

• 作者: 刘春玲 孙晓冬 张羽飞 李静 武艳 董建将 董韬
• 来源期刊: 解剖科学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 悬浮培养 拟胚体 淫羊藿苷 心肌合胞体 昆明小鼠
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 519-522
• 分类号: R329.1|Q132
• 字数: 2744字
• 语种: 中文

摘要

目的 饲养层制作及复苏培养昆明小鼠胚胎干细胞,探索体外诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化.方法 饲养层制作,复苏及体外培养胚胎干细胞,采用一步法消化贴壁胚胎干细胞,悬浮培养5d,形成拟胚体(EB),待EB贴壁后,加入淫羊藿苷(Icraiin,ICA)诱导液对其诱导并每天观察,免疫荧光检测心肌细胞特异性肌钙蛋白T(cTnT)和心室肌球蛋白轻链(MLC-2v)的表达.结果 胚胎干细胞悬浮聚集5d,形成类似球状的拟胚体,将拟胚体贴壁诱导8d,发现拟胚体中出现跳动,诱导后10d拟胚体跳动率达65%,显著高于空白对照组和阴性对照组,一个分化拟胚体中一般出现1-3个跳动点,节律约为50-80times/min,在诱导10d时跳动的合胞体,免疫荧光表明cTnT和MLC-2v表达为阳性.结论 胚胎干细胞经悬浮聚集培养5d后经10-7mol/L淫羊藿苷诱导,得到了可以跳动的心肌细胞团.