华东葡萄抗白粉病转录因子基因的克隆及亚细胞定位分析

• 作者: 余皓 王跃进 贺明阳 黎涛
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 华东葡萄 抗白粉病 转录因子 克隆 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 777-782
• 分类号: S6
• 字数: 4967字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.04.024

摘要

以抗白粉病华东葡萄(Vitis pseudoreticulata W.T.Wang)株系白河-35-1为材料,在经葡萄白粉病病原菌(Uncinula necator(Schw.)Burr.)诱导后获得的EST序列的基础上,本研究通过RACE技术克隆了一个具有转录域的转录因子全长1324 bp cDNA序列,其阅读框为1053 bp,编码350个氨基酸,命名为VpRFL1(GenBank登录号:FJ356672).应用PCR技术,进一步获得了转录因子VpRFL1基因的DNA序列,其序列全长1599 bp,VpRFL1基因包含3个外显子,2个内含子.生物信息学分析表明,华东葡萄白河-35-1 VpRFL1基因编码的氨基酸序列在N端含有核定位信号,C端含有C4C4型RING锌指结构域.VpRFL1/PBI221-GFP在洋葱(Allium cepa)表皮细胞中的瞬时表达分析表明,该转录因子主要定位于细胞核内.VpRFL1的序列特征与定位分析结果初步表明该转录因子基因在核内起作用,并可能参与了抗逆反应的相关途径.