华东葡萄抗白粉病VpMYBR1基因表达与功能分析

• 作者: 侯鸿敏 殷向静 王浩 王西平 王跃进 闫琴
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 华东葡萄 白粉病 VpMYBR1 表达 功能分析
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 1408-1418
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.07.011

摘要

[目的]从华东葡萄抗白粉病株系‘白河-35-1’中克隆VpMYBR1基因,并进行基因表达与功能分析,为揭示抗白粉病机制提供理论依据.[方法]采用RT-PCR和RACE技术克隆VpMYBR1基因cDNA全长序列,并利用半定量和定量RT-PCR技术进行不同器官和不同处理后的表达分析;通过花序浸染法转化拟南芥,对转基因及未转化对照植株抗白粉病鉴定、台盼蓝染色和抗病标记基因表达分析研究基因功能.[结果]VpMYBR1基因cDNA序列全长539 bp,有228 bp的完整开放阅读框,编码75个氨基酸,包含1个Sant/myb结构域,GenBank登录号为HQ284197;VpMYBR1基因在‘白河-35-1’不同器官中均有表达,且叶中的表达量最强,花序和果实中表达量最弱;VpMYBR1基因的表达在抗白粉病的华东葡萄‘白河-35-1’与感病的‘湖南-1’、抗病的毛葡萄‘商-24’叶片接种白粉菌6h后达到最大值,而且在‘白河-35-1’中最高,达接种前的28倍.同样,VpMYBR1基因在SA、MeJA处理后的‘白河-35-1’中的表达量明显高于‘商-24’和‘湖南-1’;将VpMYBR1基因导入野生型拟南芥,提高了转基因株系的抗病性;台盼蓝染色和抗病标记基因表达分析表明,该基因可能通过过敏反应(hypersensitive reaction,HR)提高了转基因株系的抗病性.[结论]从华东葡萄克隆了VpMYBR1基因,基因表达及功能分析表明,该基因具有提高转基因植株白粉病抗性的功能.