RNA干扰端粒酶活性对HeLa细胞生物学行为的影响

• 作者: 于晓霞 吴珊 张丽红 李玉林 王光兰 石英爱 赵强
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 关键词: HeLa细胞 RNA,小分子干扰 催化域
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 187-191
• 页数: 5页
• 字数: 4761字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-5807.2010.03.009

摘要

目的 观察RNA干扰(RNAi)体外培养的HeLa细胞端粒酶催化亚单位(hTERT)对HeLa细胞生物学行为的影响,进一步探讨端粒酶活性与肿瘤细胞恶性生物学行为的相关性.方法 体外转录法设计合成4条针对hTERT基因的shRNA,脂质体转染HeLa细胞后经免疫荧光染色和端粒重复序列扩增-酶联免疫法(TRAP-ELISA)测定端粒酶活性,筛选出端粒酶沉默效果最佳片段即B链shRNA.以B链shRNA转染HeLa细胞为实验组,转染无关siRNA的HeLa细胞为对照组,显微镜下观察细胞在纤维黏连蛋白(FN)上的铺展;CCK-8细胞计数试剂盒检测细胞在FN上黏附;划痕实验评价细胞迁移;Boyden小室侵袭实验检测细胞侵袭能力.结果 铺展实验显示细胞接种到FN上30 min时,对照组铺展细胞的比率为(31.3±7.9)%,而实验组铺展细胞的比率仅为(5.6±2.3)%,两组差异有统计学意义(P<0.01);2 h后对照组和实验组铺展细胞的比率分别为(79.4±4.8)%和(26.3±6.1)%,两组差异仍有统计学意义(P<0.01);24 h后两组所有细胞几乎均呈铺展状态.细胞黏附实验显示细胞在FN上黏附30 min时对照组细胞黏附率为(83.7±5.4)%,而实验组的细胞黏附率为(67.2±2.8)%,明显低于对照组(P<0.05).划痕实验检测细胞的迁移能力显示实验组细胞24 h迁移率为(27.1±6.2)%,明显低于对照组(58.7±15.0)%.Boyden小室侵袭实验显示在Matrigel胶上培养4 h后,实验组和对照组侵袭的细胞数分别为75.7±14.5和165.1±11.0,差异有统计学意义(P<0.05).结论 降低体外培养HeLa细胞的端粒酶活性使细胞的生物学特性发生改变,表现为减低了HeLa细胞的恶性生物学行为.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉林	吉林大学病理生物学教育部重点实验室	175	846	13.0	18.0
2	张丽红	吉林大学病理生物学教育部重点实验室	96	475	11.0	15.0
3	吴珊	吉林大学病理生物学教育部重点实验室	40	124	6.0	8.0
4	赵强		21	85	6.0	8.0
5	石英爱	吉林大学病理生物学教育部重点实验室	23	82	6.0	7.0
6	于晓霞	吉林大学病理生物学教育部重点实验室	6	15	2.0	3.0
7	王光兰	吉林大学病理生物学教育部重点实验室	7	70	4.0	7.0