旋毛虫脱氧核糖核酸酶-Ⅱ酶活及酶活性位点的鉴定

• 作者: Boireau P 于录 刘明远 吴秀萍 王学林 龙明慧
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 旋毛虫 脱氧核糖核酸酶-Ⅱ 酶活性 活性位点
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 页码范围: 209-213
• 分类号: R383.15
• 字数: 4709字
• 语种: 中文

摘要

以旋毛虫新生幼虫期(NBL)脱氧核糖核酸酶-Ⅱ(DNaseⅡ)基因家族中全长序列T31D4为研究对象,对其融合蛋白的核酸酶活性进行鉴定并摸索最佳酶切条件;通过序列分析预测其关键活性氨基酸位点,同时利用基因点突变技术对所预测的位点进行验证.结果表明:旋毛虫的DNaseⅡ具有核酸酶酶切活性,最佳酶切pH为5.0,同时发现其在中性(pH 7.0)及偏碱性(pH 8.0)下仍具有活性.利用Maga2软件对包括旋毛虫在内的以及业已发现的来自38个物种的DNaseⅡ的94个氨基酸序列进行比对,发现一个所有物种DNaseⅡ均高度保守的组氨酸位点,该结果与目前国际上所预测的DNaseⅡ关键活性氨基酸位点不同,目前国际上所预测的组氨酸位点在旋毛虫的DNaseⅡ序列中并非组氨酸(H),而是丝氨酸(S)或赖氨酸(K);通过点突变技术进一步验证这个组氨酸位点才是所有物种DNaseⅡ真正的活性氨基酸位点.同时推测旋毛虫的DNaseⅡ可能为一种新类型的DNaseⅡ.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘明远	吉林大学人兽共患病研究所	46	210	7.0	12.0
2	于录	吉林大学人兽共患病研究所	23	95	5.0	8.0
3	王学林	吉林大学人兽共患病研究所	16	44	4.0	5.0
4	吴秀萍	吉林大学人兽共患病研究所	9	23	3.0	4.0
5	龙明慧	吉林大学人兽共患病研究所	1	3	1.0	1.0