反义人DNMT1基因对乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖和细胞周期的影响

• 作者: 孙荣斌 魏钦俊 鲁雅洁
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: DNMT1基因 反义RNA 乳腺癌 MDA-MB-435s
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 205-209,240
• 页数: 6页
• 分类号: R737.9
• 字数: 4108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2010.03.006

摘要

目的 构建表达人DNMT1基因(DNA methyltransferase 1,DNMT1)反义RNA的真核表达质粒,观察其对乳腺癌细胞MDA-MB-435s增殖的影响.方法 应用DNA重组技术,将人DNMT1基因的cDNA片段克隆至pcDNA3.1(-)载体中,构建DNMTl反义RNA真核表达质粒,测序验证,将其转染人人乳腺癌细胞系中,利用荧光定量PCR法检测转染前后细胞DN-MT1基因mRNA表达水平的变化;Western blot检测转染后DNMT1蛋白表达变化;应用MTT法检测细胞生长状况,绘制细胞生长曲线;流式细胞术分析细胞周期的变化.结果 成功构建出能够表达DNMT1反义RNA的真核表达质粒.转染该质粒后,与未转染组和转染正义质粒组相比,MDA-MB-435s细胞中DNMT1基因mRNA和DNMT1蛋白表达量均显著下降;细胞生长变慢;细胞周期分析可见S期明显减少,而G1/G0期细胞显著增加.结论 反义DNMT1能够特异性下调该基因的表达,并抑制乳腺癌细胞的增殖,为乳腺癌基因治疗提供了新的靶标.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙荣斌	南京医科大学药学院	8	21	3.0	4.0
2	鲁雅洁	南京医科大学基础医学院生物技术系	24	70	4.0	7.0
3	魏钦俊	南京医科大学基础医学院生物技术系	44	194	8.0	11.0