可调控腺病毒载体Ad-RUDsRed构建及其在结肠癌SW620细胞中表达的实验研究

• 作者: 刘绪舜 宗光全 方国恩 王峰 薛绪潮 陈坚
• 来源期刊: 中华肿瘤防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒科 遗传载体 基因表达调控
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 885-889
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文

摘要

目的:构建带有RU486可调控红色荧光蛋白(DsRed)的复制缺陷型腺病毒Ad-RUDsRed,用于肿瘤基因治疗.方法:构建带有RU486调控系统和DsRed基因的腺病毒穿梭质粒pDC-RUDsRed,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定.利用AdMaxTM系统重组得到腺病毒Ad-RUDsRed,进行扩增、纯化和滴度测定;腺病毒Ad-RUDsRed感染SW620细胞细胞株后分别加入0、1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7和1×10-6mol/L的RU486诱导,利用荧光显微镜和流式细胞仪检测Ad-RUDsRed调控功能.结果:PCR结果证实,成功构建可调控腺病毒载体Ad-RUDsRed,病毒滴度3.46×1010pfu/mL.DsRed的表达与RU486剂量相关,无RU486时,报告基因DsRed几乎没有表达.给予诱导剂RU486,腺病毒栽体可以诱导表达红色荧光蛋白,RU486剂量达1×10-6mol/L时DsRed的表达量达到最大值.结论:成功构建携带RU486可调控DsRed的复制缺陷型腺病毒Ad-RUDsRed,通过RU486可以诱导调控DsRed的表达.为肿瘤的基因治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方国恩	第二军医大学附属长海医院普通外科	132	928	17.0	25.0
2	刘绪舜	解放军第81医院普通外科	30	136	7.0	10.0
3	宗光全	解放军第81医院普通外科	15	106	5.0	10.0
4	薛绪潮	第二军医大学附属长海医院普通外科	50	271	9.0	14.0
5	王峰	解放军第81医院普通外科	61	284	10.0	13.0
6	陈坚	解放军第81医院普通外科	26	112	6.0	10.0