猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因的克隆及其表达载体的构建

• 作者: 刘霞 徐健 汤德元 王彬 黄涛
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（科技版）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 贵州分离株 ORF5基因 克隆 表达载体 构建
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 102-104
• 页数: 3页
• 分类号: S852.65+9.6
• 字数: 3494字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7034.2010.02.048

摘要

为了研究猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因的表达,研究参照GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株(PRRSV Guizhou-1)的核苷酸序列,利用DNASTAR、Oligo6.0和Primer Premier 5.0软件设计1对ORF5基因的特异性引物,同时将贵州大学动物科学学院分子生物学实验室分离、保存的PRRSV Guizhou-1接种于Marc-145细胞,产生明显细胞病变后收集病毒,用Trizol法提取总RNA进行RT-PCR扩增后获得目的基因,并将其克隆于质粒pMD18-T载体后转入大肠杆菌Top10细胞中,然后分别克隆于原核表达载体pET-32a(+)和真核表达载体pcD-NA3.1(+)中,再进行抗性筛选、酶切鉴定和序列测定.结果表明:得到含有目的基因的阳性克隆,成功构建了猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因原核表达载体pET-ORF5及真核表达载体pcDNA-ORF5.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤德元	贵州大学动物科学学院	256	1165	16.0	26.0
2	王彬	贵州大学动物科学学院	72	488	10.0	21.0
3	刘霞	贵州大学动物科学学院	20	83	6.0	8.0
4	徐健	贵州大学动物科学学院	31	191	9.0	13.0
5	黄涛	贵州大学动物科学学院	78	187	9.0	11.0