分化抑制因子1促进血管内皮细胞增殖的机制研究

• 作者: 党伟 孙荣距 张宪 张建波 果应菲 秦宇红 袁晓玲 赵晓东 闫乐媛
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,Id1 基因,p21 转录因子E2A 细胞周期 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 364-366
• 页数: 3页
• 分类号: R641.023
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨分化抑制因子1(Id1)促进血管内皮细胞增殖的机制.方法 构建p21启动子介导的报告基因p21-Luc,分别转染Eahy926细胞、Id1抑制(siId1细胞)或诱导表达(pcDNAId1)细胞、E2A抑制或诱导表达细胞,检测荧光素酶报告基因活性.提取Eahy926细胞总蛋白,分别加入Id1抗体,E12抗体和E47抗体,免疫共沉淀,以Eahy926细胞作为对照,Western blotting检测ld1、E12和EA7的表达情况.分别转染siId1、pcDNAId1载体于Eahy926细胞,与正常Eahy926细胞同步化培养48h后,行细胞染色,用流式细胞仪检测细胞G_1期的DNA含量.结果 与Eahy926细胞比较,siId1细胞、pcDNAE2A细胞p21基因启动子介导的荧光素酶活性增强,p21蛋白表达增高(P＜0.05,P＜0.01);pcDNAld1细胞、siE2A细胞p21基因启动子荧光素酶活性降低,p21蛋白表达减弱(P＜0.05).免疫共沉淀结果显示,Id1免疫共沉淀细胞裂解物中同时检测到E47/E12蛋白,E47/E12沉淀物中也能榆测到Id1.与正常Eahy926细胞比较,转染siId1的细胞G_1期DNA含量增多,约为Erday926细胞的3.3倍(P＜0.05),细胞周期停滞,细胞增殖缓慢;而转染pcDNAF2A的细胞G_1期DNA含量减少,约占正常的35.4%(P＜0.05),细胞周期演进,细胞增殖加快.结论 Id1可能通过与转录因子E47/E12作用,调节p21表达,进而促进血管内皮细胞增殖.