ELISA方法检测抗体中两种显色系统的比较研究

• 作者: 卫礼 岳秉飞 王吉 贺争鸣
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: ELISA 小鼠肝炎病毒 TMB OPD
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 368-371
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3194字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2010.05.012

摘要

目的 用TMB(3,3,5,5-四甲基联苯胺)替代OPD(邻苯二胺)作为ELISA实验中的显色剂,以减少OPD对实验操作人员的危害及对环境的污染. 方法 依据国家标准ELISA法进行操作,对小鼠肝炎病毒(MHV)抗体ELISA法的OPD和TMB两种显色系统的稳定性、特异性、敏感性及重复性进行比较. 结果 TMB系统较OPD系统:TMB比OPD稳定,相对偏差(15.3%)小于OPD(17.7%);TMB系统特异抗原孔P/N值高于OPD特异抗原孔P/N值,差异显著(P<0.05);酶的使用浓度TMB是OPD的0.25倍,检测灵敏度是OPD的2倍;使用TMB,正常抗原和特异抗原孔批内和批间变异系数分别为3.9%、4.7%和13.0%、11.3%:而OPD分别为2.7%、4.5%和11.2%、9.5%. 结论 TMB较OPD稳定性、重复性好,敏感性、特异性强,可以替代OPD作为MHV抗体ELISA法的显色剂.