siRNAs干扰EBNA1下调EBV阳性鼻咽癌细胞内ALOX12的表达

• 作者: 买世娟 刘文举 王凤伟
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: EB病毒 EB病毒核抗原1 RNA干扰 鼻咽癌
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 755-760
• 分类号: R73-3
• 字数: 4087字
• 语种: 中文

摘要

[目的]利用RNA干扰技术抑制C666-1细胞中EB病毒核抗原1(EBNA1)的表达,探索氧化应激与抗氧化相关基因的表达变化.[方法]采用蛋白质印迹证实了能有效抑制EBNA1表达的干扰序列,使用甲基噻唑基四唑(MYT)方法检测C666-1细胞的存活率,利用实时定量PCR芯片技术探索了氧化应激与抗氧化相关基因的转录谱变化,并通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹进行了验证.[结果]EBNA1-1414和EBNA1-1437干扰序列转染C666-1细胞48 h后,分别可抑制59%和56%的EBNA1蛋白表达,细胞存活率分别降低了33%和24%.PCR芯片实验发现干扰EBNA1表达后48 h C666一l细胞中花生四烯酸盐12-脂氧合酶(ALOXl2)蛋白表达有下调,谷胱甘肽还原酶(GSR)和过氧化物酶3(PRDX3)在转录水平表达上调.[结论]EBNA1或许能够通过上调ALOX12的表达间接地发挥促鼻咽癌作用.