环境基因组DNA脂肪酶基因克隆与分析

• 作者: 万霞 张银波 江木兰 王汉中
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 环境基因组 脂肪酶 简并PCR 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 269-273
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|Q936.561
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1145.2010.00269

摘要

为了建立从环境基因组DNA中直接克隆脂肪酶基因的通用方法,抽提餐馆灶台油污的环境基因组DNA,采用简并PCR等分子技术从中克隆到脂肪酶基因lip42及其对应的全长cDNA.序列分析表明该基因的cDNA编码区序列全长为1 692 bp,编码1段由19个氨基酸残基组成的信号肽和1段由544个氨基酸残基组成的成熟肽,计算相对分子质量为61 541.51,其中含有强碱性氨基酸残基42个,强酸性氨基酸残基56个,等电点pI为5.428,有2个可能的N-糖基化位点.BLAST比对分析表明该序列与已发表的白地霉(Geotrichum geotrichum)脂肪酶基因(U02541)在核苷酸水平的一致性为99%.该基因序列提交GenBank,登录号为DQ313172.将该脂肪酶基因的开放阅读框克隆到毕赤酵母表达载体,转化毕赤酵母GS115,经罗丹明B平板功能筛选得到具脂肪酶活性的重组毕赤酵母菌株[GS115(pAMB768)],验证了直接从环境基因组DNA克隆脂肪酶基因的有效性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江木兰	中国农业科学院油料作物研究所	36	804	14.0	28.0
2	张银波	中国农业科学院油料作物研究所	22	675	12.0	22.0
3	王汉中	中国农业科学院油料作物研究所	54	2506	25.0	50.0
4	万霞	中国农业科学院油料作物研究所	21	132	7.0	11.0