家蚕胰脂肪酶相关蛋白1基因(BmPLRP1)的克隆及表达分析

• 作者: 刘明珠 徐安英 李刚 李玉霞 赵国栋 郝长富 钱荷英
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 家蚕 胰脂肪酶相关蛋白1(PLRP1) 克隆 序列特征 表达谱
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 页码范围: 82-88
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2020.0012

摘要

胰脂肪酶相关蛋白1(Pancreatic lipase-related protein 1,PLRP1)是由PLRP1基因编码的一种脂肪酶,在通常状态下无活性.PLRP1的分泌与生物的生长发育有着密切的联系,但该基因在家蚕中的功能尚未清楚.本研究克隆获得家蚕PLRP1基因(BmPLRP1)的核苷酸序列,并对其序列特征进行生物信息学分析,进一步采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR检测BmPLRP1基因的表达水平.结果表明,该基因位于家蚕第12号染色体的nscaf2993位点,编码331个氨基酸,等电点为8.72,预测的BmPLRP1蛋白无信号肽、分子质量为37.1 kD,没有跨膜结构域,具有一个Pancreat_lipase_like结构域,存在活性位点、磷酸化位点、O-糖基化位点,不存在N-糖基化位点.系统进化分析表明BmPLRP1与野桑蚕的PLRP1的进化关系较近;RT-PCR检测表明,BmPLRP1基因在家蚕5龄3天幼虫的头部、表皮、丝腺、生殖器、气管丛、中肠中有明显表达,而在血液和脂肪体中的表达量相对较低;对家蚕品种'733xin'喂食经100 mg/kg NaF溶液浸泡过的桑叶后,实时定量PCR检测BmPLRP1基因在中肠、血液、丝腺、脂肪体中的相对表达量,结果表明均有所上调,推测该基因可能参与了氟化物侵染家蚕后的应答反应过程.